कॉलम क्रोमैटोग्राफी

कॉलम क्रोमैटोग्राफी एक प्रारंभिक तकनीक है जिसका उपयोग यौगिकों को उनकी ध्रुवता के आधार पर शुद्ध करने के लिए किया जाता है। कॉलम क्रोमैटोग्राफी में, अणुओं के मिश्रण को एक गतिशील चरण और एक स्थिर चरण के बीच उनके अंतर विभाजन के आधार पर अलग किया जाता है। क्रोमैटोग्राफी प्रारंभिक या विश्लेषणात्मक हो सकती है। जिसमे एक पाश्चर पिपेट का उपयोग स्तंभ के रूप में किया जाता है और सामान्यतः मिश्रण को अलग करने के लिए 1 ग्राम अधिशोषक (अर्थात सिलिका/एल्यूमिना) का उपयोग किया जाता है।

कॉलम क्रोमैटोग्राफी में 15 मिनट से अधिक समय नहीं लगना चाहिए, जिसमें 1 मिलीग्राम से 10 ग्राम तक के स्केल के लिए अंश संग्रह और वाष्पीकरण सम्मिलित है। मिश्रण में 2 या अधिक यौगिकों के लिए करीबी आरएफ वाले 4 या अधिक उत्पादों के लिए विशेष रूप से कठिन पृथक्करण के लिए, अपने कुल कॉलम समय में 10 मिनट जोड़ें। कॉलम क्रोमैटोग्राफी यौगिकों को अलग करने के लिए अणु की ध्रुवीयता का उपयोग करती है। ध्रुवीयता में अंतर से अणुओं के स्तंभ के माध्यम से जाने की दर में भिन्नता होती है, जो प्रभावी रूप से यौगिकों को एक दूसरे से अलग करती है।

कॉलम क्रोमैटोग्राफी एक अत्यधिक प्रारंभिक तकनीक है जिसका उपयोग यौगिकों को शुद्ध करने के लिए किया जाता है। कॉलम क्रोमैटोग्राफी को उनकी ध्रुवता के आधार पर शुद्ध करने के लिए किया जाता है। इस विधि में अणुओं के मिश्रण को एक मोबाइल चरण और एक स्थिर चरण के बीच उनके अंतर विभाजन के आधार पर अलग किया जाता है। जिसमे एक पाश्चर पिपेट का उपयोग स्तंभ के रूप में किया जाता है और सामान्यतः मिश्रण को अलग करने के लिए 1 ग्राम अधिशोषक (अर्थात सिलिका/एल्यूमिना) का उपयोग किया जाता है।

निम्नलिखित में से किसका उपयोग अधिशोषण क्रोमैटोग्राफी में अधिशोषक के रूप में नहीं किया जा सकता है?

• इस विधि में एक पाश्चर पिपेट और ~1 ग्राम सिलिका या एल्यूमिना ऑक्साइड लेते हैं।
• फिर पाश्चर पिपेट को इस प्रकार व्यवस्थित करतें हैं कि यह सीधा हो और इसे क्लैंप से सुरक्षित करें।
• अन्य पाश्चर पिपेट या तार का उपयोग करके पिपेट के आधार में थोड़ी मात्रा में कांच का ऊन डाला जाना चाहिए। यह किसी भी सूक्ष्म कण को ​​अंदर जाने से रोकने के लिए किया जाता है।
• उसके उपरांत सिलिका को छोटे कीप के माध्यम से पिपेट में जोड़ा जाता है।
• इसमें सिलिका का शीर्ष समतल होना चाहिए। यदि सिलिका समतल नहीं है, तो पिपेट को किसी वस्तु पर धीरे से थपथपाएं कि यह समतल हो जाए (इस तकनीक को ड्राई लोडिंग कहते है)।
• प्रवाह दर को नियंत्रित करने के लिए स्टॉपकॉक बनाने के लिए आप एक छोटे क्लैंप वाले कॉलम का उपयोग कर सकते हैं।

नमूना लोड करने में सहायता के लिए स्तंभ के शीर्ष पर (लगभग 2 मिमी ऊंची) थोड़ी मात्रा में रेत डाली जा सकती है (यह नमूना को स्तंभ के माध्यम से आसानी से जाने में मदद करेगा)। इस मामले में शीर्ष पर रेत की परत भी समतल होनी चाहिए। इसमें प्रयोग किये गए विलायक का उपयोग कॉलम को गीला करने के लिए किया जाता है। यह कॉलम (गीली लोडिंग) को कॉम्पैक्ट करने में मदद करता है। प्रयोग समाप्त होने तक इसकी सतह को गीला रखना चाहिए।

अभ्यास प्रश्न

• अधिशोषण-वर्णलेखन से क्या तात्पर्य है ?
• कॉलम-वर्णलेखन, अर्थात् स्तम्भ-वर्णलेखन से आप क्या समझते है?
• सिलिका या एल्यूमिना ऑक्साइड का उपयोग किस प्रकार करते हैं?