निवेशी निष्क्रियता
निवेशी निष्क्रियता एक तकनीक है जिसका उपयोग आनुवंशिक इंजीनियरिंग में पुनः संयोजक डीएनए अणुओं की पहचान और चयन करने के लिए किया जाता है। इसमें एक जीन के भीतर एक विशिष्ट साइट में एक विदेशी डीएनए खंड का सम्मिलन शामिल है, आमतौर पर एक चयन योग्य मार्कर जीन के भीतर, एक प्लास्मिड या वेक्टर पर। जब यह सम्मिलन होता है, तो यह जीन के कार्य को बाधित (निष्क्रिय) करता है। उदाहरण के लिए, यदि एंटीबायोटिक प्रतिरोध (जैसे β-गैलेक्टोसिडेस या एम्पीसिलीन प्रतिरोध) के लिए एंजाइम को एनकोड करने वाला जीन निष्क्रिय हो जाता है, तो परिणामस्वरूप पुनः संयोजक बैक्टीरिया एंजाइम का उत्पादन करने की क्षमता खो देगा। इस परिवर्तन का पता विशिष्ट स्क्रीनिंग विधियों के माध्यम से लगाया जा सकता है, जैसे कि X-gal जैसे रंगमिति सब्सट्रेट का उपयोग करना, जहाँ पुनः संयोजक कॉलोनियाँ नीले रंग के बजाय सफेद दिखाई देती हैं। निवेशी निष्क्रियता शोधकर्ताओं को आणविक क्लोनिंग प्रयोगों में पुनः संयोजक और गैर-पुनः संयोजक कॉलोनियों के बीच आसानी से अंतर करने में मदद करती है।
उद्देश्य: पुनः संयोजक डीएनए अणुओं की पहचान करने और पुनः संयोजक तथा गैर-पुनः संयोजक कोशिकाओं के बीच अंतर करने के लिए उपयोग किया जाता है।
तंत्र: विदेशी डीएनए का सम्मिलन प्लास्मिड या वेक्टर पर एक विशिष्ट मार्कर जीन को निष्क्रिय कर देता है।
सामान्य मार्कर जीन: आम तौर पर एंटीबायोटिक प्रतिरोध (जैसे, एम्पीसिलीन प्रतिरोध) या रंग-उत्पादक एंजाइम (जैसे, β-गैलेक्टोसिडेस) के लिए जीन शामिल होते हैं।
X-gal के साथ उदाहरण: जब lacZ जीन निष्क्रिय होता है, तो पुनः संयोजक कॉलोनियाँ β-गैलेक्टोसिडेस का उत्पादन नहीं करती हैं और X-gal माध्यम पर सफ़ेद दिखाई देती हैं, जबकि गैर-पुनः संयोजक कॉलोनियाँ नीली रहती हैं।
लाभ:
- पुनः संयोजक कोशिकाओं की जांच के लिए सरल और विश्वसनीय विधि।
- जटिल परख की आवश्यकता को समाप्त करता है।
अभ्यास प्रश्न
- निवेशी निष्क्रियता क्या है?
- निवेशी निष्क्रियता पुनः संयोजक डीएनए की पहचान करने में कैसे मदद करती है?
- निवेशी निष्क्रियता में मार्कर के रूप में आमतौर पर कौन से जीन का उपयोग किया जाता है?
- जब किसी मार्कर जीन में विदेशी डीएनए डाला जाता है तो उसका क्या होता है?
- निवेशी निष्क्रियता प्रयोगों में अक्सर β-गैलेक्टोसिडेस का उपयोग क्यों किया जाता है?
संकल्पनात्मक प्रश्न:
- X-gal का उपयोग पुनः संयोजक कॉलोनियों की पहचान करने में कैसे मदद करता है?
- निवेशी निष्क्रियता में पुनः संयोजक और गैर-पुनः संयोजक कॉलोनियों के बीच क्या अंतर है?
- इस तकनीक में एंटीबायोटिक प्रतिरोध जीन का चयन योग्य मार्कर के रूप में उपयोग क्यों किया जाता है?
- निवेशी निष्क्रियता में lacZ जीन की क्या भूमिका है?
- क्या निवेशी निष्क्रियता का उपयोग किसी भी जीन के साथ किया जा सकता है? क्यों या क्यों नहीं?
